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产品简介
产品名称:免疫球蛋白G柱规格型号:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包)品牌|厂商:GE Pharmacia
本标准规定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定方法。 本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定。 本方法检出限:当取样量 0.1g,稀释至25mL,进样量20μL时,检出浓度为0.5mg/mL。 原理 根据高效亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白 IgG与配基连接,在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。 试剂 流动相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐
适用范围
本标准规定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定方法。
本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定。
本方法检出限:当取样量 0.1g,稀释至25mL,进样量20μL时,检出浓度为0.5mg/mL。
原理
根据高效亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白 IgG与配基连接,在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。
试剂
流动相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液
流动相 B:pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液
IgG标准贮备液:称取IgG标准品(Sigma化学公司)0.0100g,用流动相A(3.1)溶解并定容至10.0mL,摇匀,浓度为1.0mg/mL。
IgG标准系列溶液:取IgG标准贮备液,用用流动相A(3.1)稀释成含IgG 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0mg/mL的标准系列。临用时配制。
仪器和设备
高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。
分析步骤
试样处理:称取 0.1g(精确至0.001g)试样,用流动相A(3.1)稀释至25.0mL,摇匀,通过0.45μm微孔滤膜后进样。
5.2.1 先用5倍柱体积的重蒸水洗柱,再用10倍柱体积的流动相A(3.1)平衡柱,进样,按洗脱程序进行洗脱。
5.2.2 HPLC参考条件
色谱柱: Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL。
波长: 280nm
进样量: 20μL
梯度洗脱表:
Time Flow mL/min A% B% Gradient
0 0.4 100 0 ※
4.5 0.4 100 0 6
5.5 0.4 0 100 6
15.0 0.4 0 100 6
15.5 0.4 100 0 6
22.0 0.4 100 0 6
| 蛋白质 G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(5支/包) |
| 蛋白质 G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包) |